Индол
Индол — ядовитое для животных вещество, продукт неполного распада белков, содержащих аминокислоту триптофан. Проба на индол используется в микробиологии для идентификации бактерий, например, кишечной палочки (Escherichia coli).
Методы определения индола
Метод Эрлиха
Этот метод считается классическим и высокоспецифичным.
Ход анализа:
- К 5 мл 2–3-суточной исследуемой культуры (лучше выращенной в среде Хоттингера) добавляют 2–3 мл этилового эфира.
- Смесь тщательно перемешивают и отстаивают несколько минут для расслоения.
- На отстоявшийся слой осторожно, по стенке пробирки, наслаивают 5–8 капель реактива Эрлиха. Реактив готовят растворением 1 г парадиметилбензальдегида в 90 мл 96% этилового спирта с последующим добавлением 20 мл концентрированной серной кислоты.
- Учёт результата проводят в течение 5 минут. При наличии индола слой эфира окрашивается в малиново-розовый цвет.
Близкий метод: Метод Ковача, который является модификацией метода Эрлиха.
Метод Сальковского
Этот метод считается менее специфичным.
Ход анализа:
- К 2-суточной бульонной культуре добавляют несколько капель концентрированной серной кислоты.
- На полученную смесь наслаивают 0.01% раствор нитрата натрия.
- Пробирку помещают в термостат при 37 °C.
- Через 2 часа учитывают результат: появление розоватой опалесценции указывает на присутствие индола.
Проба с реактивными бумажками
Этот метод прост, но менее чувствителен.
Ход анализа:
- Используют полоску бумаги, пропитанную насыщенным раствором щавелевой кислоты.
- Эту полоску подвешивают над засеянной исследуемым штаммом жидкой средой (между пробкой и стенкой пробирки).
- Пробирку с полоской инкубируют в термостате.
- В присутствии индола конец бумажной полоски окрашивается в розовый цвет.
