Комплемента определение
Определение комплемента проводится с целью изучения состава и функциональной активности компонентов системы комплемента. Обычно исследование ведут в трёх направлениях:
- Определение концентрации отдельных компонентов комплемента в сыворотке крови или другом биологическом материале. Для этого используют реакцию простой радиальной иммунодиффузии по Манчини (см. Преципитация реакция).
- Определение функциональной активности классического или альтернативного пути активации, а также активности отдельных компонентов. Это делают методом гемолитического титрования, который позволяет установить наличие функционально активных компонентов, готовых при необходимости вступить в реакцию активации.
- Определение концентрации продуктов активации компонентов комплемента, образующихся в ходе каскадной реакции (например, C3a, C5a, C2b, C4a, Bb и др.). Для этого применяют иммуноферментный или радиоиммунный метод. Такой анализ позволяет установить, по какому пути (классическому или альтернативному) происходит активация комплемента в организме.
Современный контекст
Современная диагностика нарушений системы комплемента значительно расширилась. Помимо перечисленных методов, широко используются:
- Проточная цитометрия для оценки экспрессии мембранных белков комплемента на клетках.
- Молекулярно-генетические методы (секвенирование нового поколения, NGS) для выявления наследственных мутаций в генах компонентов комплемента, что особенно важно при диагностике атипичного гемолитико-уремического синдрома (аГУС) и других заболеваний.
- Автоматизированные хемолюминесцентные и турбидиметрические анализаторы, позволяющие быстро и точно определять концентрацию и функциональную активность компонентов.
- Активно изучаются и определяются новые биомаркеры активации комплемента, такие как sC5b-9 (мембраноатакующий комплекс, MAC), который является конечным продуктом активации и прямым свидетельством литической активности системы.
