Уреаза

Уреаза — фермент, катализирующий расщепление мочевины на аммиак и углекислый газ. Широко распространён у некоторых групп бактерий. Определение уреазы используют для идентификации бактерий.

Для этого мочевину добавляют в среду Олькеницкого или применяют специальные методики. Например, для установления уреазной активности у коринебактерий используют бульон с pH 7,0, к которому добавляют 1% мочевины и на 10 мл среды — 0,2 мл 1,6% спиртового раствора крезолового красного. Среду распределяют по 2–3 мл в стерильные пробирки, стерилизуют текучим паром, засевают исследуемой культурой и инкубируют около суток при 37 °C. Синтезирующие уреазу бактерии вызывают покраснение среды.

Широко применяют также методику Закса. Для этого готовят концентрированный самостерилизующийся раствор мочевины (1 часть мочевины, 1 часть 96% этилового спирта и 2 части дистиллированной воды), который хранят при температуре +4...+10 °C. Перед употреблением 1 часть раствора мочевины разводят в 19 частях солевого раствора, содержащего:

• 0,1 г однозамещённого фосфата калия,
• 0,1 г двузамещённого фосфата калия,
• 0,5 г хлорида натрия,
• 1 мл 0,2% раствора фенолового красного, растворённых в 100 мл воды.

Смесь разливают по 0,1 мл в пробирки, засевают в неё густую суспензию исследуемого микроба и инкубируют в термостате 30 минут. При выделении микробом уреазы смесь окрашивается в розовый цвет.

См. также: Среда Христенсена.