Новый метод получения наивных человеческих iPS-клеток с повышенной способностью к дифференцировке

Совместная исследовательская группа под руководством доктора Акиры Кунитоми, бывшего постдока в CiRA (ныне исследователя в Институте сердечно-сосудистых заболеваний Гладстона), и компании ID Pharma Co., Ltd. разработала новый метод получения наивных iPS-клеток, использующий созданный группой термочувствительный вектор вируса Сендай для быстрого удаления векторов.

До сих пор только дермальные фибробласты успешно репрограммировались в наивные iPS-клетки с помощью методов, использующих векторы вируса Сендай и клетки-фидеры. В новом исследовании совместной группе удалось получить наивные iPS-клетки не только из человеческих дермальных фибробластов, но и из мононуклеарных клеток периферической крови, изменив комбинацию репрограммирующих генов.

Исследователи создали термочувствительный вектор вируса Сендай, который можно быстро удалить в процессе репрограммирования, и разработали метод без использования фидеров для получения наивных iPS-клеток из дермальных фибробластов с помощью модифицированных векторов.

Кроме того, группа показала, что наивные iPS-клетки, полученные новым методом, лучше дифференцируются в клетки трех зародышевых листков и внезародышевый трофэктодерм, чем клетки, полученные традиционными методами. Это связано с тем, что раннее удаление векторов вируса Сендай подавляет экспрессию экзогенных генов.

В последнее время наивные человеческие плюрипотентные стволовые клетки широко используются в исследованиях ранних человеческих эмбрионов благодаря их высокой плюрипотентности. Ожидается, что новый протокол, созданный в этом исследовании, внесет вклад в развитие таких исследований и не только.

Поскольку метод применим и для получения праймированных человеческих iPS-клеток, исследователи смогут получать клеточные линии, свободные от геномов вирусных векторов, без трудоемкого процесса клонового отбора. Также ожидается, что новый метод облегчит получение аутологичных iPS-клеток от доноров и продвинет исследования в области моделирования заболеваний, разработки лекарств и клеточной терапии.

Результаты этого исследования были опубликованы онлайн в журнале Cell Reports Methods 17 октября 2022 года.