Улучшение методов клонирования рыбки данио-рерио
Исследователи из Университета штата Мичиган разработали новый, более эффективный метод клонирования рыбки данио-рерио. Этот прорыв может иметь значение для исследований в области здоровья человека.
Работа, подробно описанная в недавнем выпуске журнала Nature Methods, важна, поскольку данио-рерио быстро становятся модельным организмом выбора для многих учёных.
"После мыши это наиболее часто используемое позвоночное животное в генетических исследованиях", — сказал Хосе Сибелли, профессор зоотехники MSU и соавтор статьи. — "Оно используется в исследованиях рака и сердечно-сосудистых заболеваний, потому что у них много тех же генов, что и у нас".
Более 20 лет данио-рерио служат отличной моделью для понимания нормального развития и врождённых дефектов. В последнее время исследования с их использованием расширились до моделирования человеческих болезней и анализа формирования и функций клеточных популяций в органах.
Предыдущие методы клонирования данио-рерио имели очень низкий процент успеха. С использованием нового метода количество клонированных рыб, которое можно получить из клетки взрослого плавника или эмбрионального хвостового среза, увеличилось на 2% и 13% соответственно.
Новый метод клонирования:
- Инактивация яйцеклетки: Яйцеклетку аккуратно извлекают из самки данио-рерио и помещают в раствор овариальной жидкости из чавычи (лосось). Это обездвиживает яйцеклетку на 2–3 часа, давая время на работу.
- Удаление ДНК: ДНК удаляют из яйцеклетки с помощью лазера, используя технику из экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) человека.
- Пересадка донорской клетки: Команда разработала новый, более эффективный способ трансплантации донорских клеток в яйцеклетку, используя то же отверстие, что и сперматозоид.
Данио-рерио особенно полезны в исследованиях, потому что их яйцеклетки прозрачны, и развитие рыбы легко отслеживать.
Усовершенствование методов клонирования данио-рерио также важно, поскольку в настоящее время только мышь остаётся лучшей моделью для генного таргетинга.
"Пока что мышь — единственная, у которой можно надёжно удалять гены", — отметил Сибелли. — "Исследователи мутируют ген, полностью отменяют его функцию, а затем изучают последствия".