Ученые разработали новый тип линейной гибридизационной цепной реакции

Ученые из Сучжоуского института биомедицинской инженерии и технологий (SIBET) Китайской академии наук разработали новый тип линейной гибридизационной цепной реакции для высокочувствительного и селективного анализа целевых нуклеиновых кислот.

Принцип работы:

• Наночастицы Fe₃O₄ с золотым покрытием используются для иммобилизации большого количества ДНК-зонда А, комплементарного целевой miRNA.
• Фермент DSN расщепляет образовавшиеся дуплексы ДНК/РНК, высвобождая целевую miRNA для повторного участия в реакции, а также одноцепочечные зонды B и C.
• Зонды B и C связываются с жесткой трехмерной структурой ДНК-треугольной призмы (TPDNA) на поверхности электрода.
• Это запускает каскадную линейную гибридизационную цепную реакцию с участием цепей H1–H4, формируя длинную лестничную структуру ДНК с множеством аминогрупп.
• На эти группы иммобилизуются наночастицы серебра, выступающие в качестве электродных меток.

Результаты:

• Метод позволяет достичь предела обнаружения 5×10^-18 моль/л с хорошей селективностью.
• Реакции подтверждены электрофорезом в полиакриламидном геле и электрохимическими методами.
• Испытания на реальных клинических образцах дали удовлетворительные результаты.

Исследование опубликовано в журнале Biosensors and Bioelectronics под названием "Ultrasensitive miRNA biosensor amplified by ladder hybridization chain reaction on triangular prism structured DNA".