Когда стволовая клетка действительно стволовая? Новый метод идентификации
Исследователи из Детской больницы Бостона разработали новый метод, позволяющий точно отличить полностью перепрограммированные индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (iPS-клетки) от неполноценных. Это важно, поскольку iPS-клетки — взрослые клетки, возвращённые в эмбриональное состояние, — представляют большой интерес для медицины, но процесс их создания часто неточен.
Проблема неполного перепрограммирования
При создании iPS-клеток из взрослых клеток (например, фибробластов кожи) образуются колонии, которые под обычным микроскопом выглядят как эмбриональные стволовые клетки. Однако, как показало исследование, эти колонии состоят из трёх различных стадий перепрограммирования, и лишь одна из них даёт по-настоящему плюрипотентные клетки.
«Предыдущие исследования часто использовали маркеры, недостаточные для того, чтобы отличить полностью перепрограммированные клетки от частично перепрограммированных», — говорит Торстен Шлегер, PhD, соавтор работы.
Комплексный подход вместо единичных маркеров
Новый метод использует не один маркер, а серию тестов для определения «подписи» полностью перепрограммированной клетки:
- Тесты на флуоресцентные маркеры.
- Тест на образование тератом (опухолей, содержащих клетки всех трёх первичных зародышевых листков) у мышей с ослабленным иммунитетом.
- Кариотипирование (анализ хромосом).
- Тесты на другие молекулярные характеристики плюрипотентности.
В экспериментах только клетки с одной из трёх стадий перепрограммирования сформировали истинные, хорошо дифференцированные тератомы с молекулярными характеристиками, идентичными эмбриональным стволовым клеткам.
Стандарт для отрасли
По словам Шлегера, ни один из тестов не является чрезмерно дорогим или сложным для лаборатории, но многие могут пытаться срезать углы. «Наше исследование создаёт стандарт анализа в этой области и напоминает о необходимости быть тщательными при характеристике или заявлениях о предполагаемых плюрипотентных стволовых клетках».
Источник: Статья «Live cell imaging distinguishes bona fide human iPS cells from partially reprogrammed cells» опубликована 11 октября в журнале Nature Biotechnology.