Перспективный новый инструмент для измерения антител против малярии
Антитела против множества белков (антигенов) Plasmodium falciparum можно измерить с помощью простого, точного и воспроизводимого анализа, требующего очень малых объемов крови. В серии недавно опубликованных статей команда под руководством ISGlobal сообщает о разработке и оптимизации нескольких количественных анализов на суспензионном микрочипе (qSAT) для оценки естественного и вакцино-индуцированного иммунного ответа на малярию и других паразитов.
Антительный ответ против паразитов P. falciparum критически важен для контроля или предотвращения малярии. Однако о типе и специфичности этих защитных антител, а также о механизме их работы известно относительно мало. Ситуацию осложняет тот факт, что паразит экспрессирует более 5000 белков.
Карлота Добаньо и ее группа разработали новые лабораторные протоколы для измерения антител к множеству антигенов P. falciparum в одной реакции и с использованием малых объемов циркулирующей крови. Используемый qSAT заключается в присоединении небольших микрочастиц (бисера) к различным антигенам паразита с последующей проверкой их распознавания образцами плазмы людей, подвергавшихся (или нет) воздействию малярии.
Авторы:
- Адаптировали анализ для чувствительного и специфичного обнаружения различных типов и классов антител против множества антигенов P. falciparum.
- Показали, что этот простой мультиплексный анализ обладает высокой воспроизводимостью не только между экспериментами, но и между операторами и лабораториями.
- Определили ключевые факторы, которые необходимо оптимизировать для снижения вариабельности анализа.
- Использовали этот тест для лучшей характеристики профиля антител в пуле человеческой плазмы против малярии, предоставленном ВОЗ в качестве референсного реагента. Они показали, что он содержит низкие уровни антител к CSP (антигену, содержащемуся в вакцине RTS,S), что указывает на возможную необходимость в специально подобранных референсных пулах для изучения ответа на определенные антигены.
"Эти простые и воспроизводимые мультиплексные протоколы позволят нам детально анализировать естественный и вакцино-индуцированный антительный ответ на большие панели антигенов P. falciparum и выявлять корреляты защиты от малярии, — объясняет Добаньо. — Более того, анализ высоко универсален и может быть адаптирован для изучения ответа на антигены других микробов или вакцин. В настоящее время мы сотрудничаем с несколькими группами за пределами области малярии".