Туляремия

Туляремия — острое или хроническое системное природно-очаговое заболевание человека и животных, вызываемое бактерией Francisella tularensis. Этот возбудитель относится к группе грамотрицательных аэробных или микроаэрофильных палочек и кокков.

Характеристика возбудителя

Francisella tularensis представляет собой очень мелкие, полиморфные, неподвижные бактерии, не образующие спор. Они являются хемоорганотрофными аэробами.

  • Форма: Чаще шаровидная или овоидная.
  • Размер: 0,2 — 0,7 мкм.
  • Окраска: В мазках из патологического материала, окрашенных по Романовскому—Гимзе, выявляется нежная капсула.

Культуральные свойства

Бактерия не растёт на простых питательных средах. Хороший рост культуры отмечается:

Биохимические и антигенные свойства

В зависимости от географического распространения, патогенности для кроликов, способности ферментировать глицерин и цитруллин выделяют три эковара (подвида).

Диагностика туляремии

Для микробиологической диагностики используют главным образом серологические и аллергические методы. В специальных лабораториях применяют бактериологический метод и биопробу.

Аллергический метод (проба с тулярином)

У больных туляремией сенсибилизация наступает рано, уже на 3 — 4-й день болезни, поэтому для ранней диагностики может быть использована внутрикожная или накожная проба с тулярином. Проба также положительна у переболевших и привитых людей.

  • Препараты: Существуют раздельные препараты тулярина для внутрикожной и накожной пробы. В первом содержится 500 млн бактерий в 1 мл, во втором — 10 млрд бактерий в 1 мл.
  • Накожная проба: На очищенную кожу средней трети наружной поверхности плеча наносят каплю тулярина и через неё делают две параллельные насечки длиной 8 — 10 мм, после чего плоской стороной скарификатора (или пера) препарат втирают в насечки. Реакцию учитывают через 48 — 72 часа. За положительную пробу принимают инфильтрат размером не менее 5 мм вокруг или по ходу насечек.
  • Внутрикожная проба: Тулярин в объёме 0,1 мл вводят в кожу ладонной поверхности средней трети предплечья. Реакцию учитывают через 24 и 48 часов. За положительную пробу принимают инфильтрат диаметром не менее 5 мм.

Серологические методы

Для серологической диагностики используют реакцию агглютинации (РА), реакцию пассивной гемагглютинации (РПГА) и её торможение, а также реакцию иммунофлюоресценции (РИФ).

  • Реакция агглютинации (РА): Ставят по типу реакции Райта с разведениями сыворотки от 1:25 до 1:400 и коммерческим диагностикумом, разведённым в 5 раз физиологическим раствором. Оба реагента берут в объёме 0,5 мл. Результаты анализируют через 18 — 24 часа. Диагностическое значение имеет титр 1:100. Такая концентрация антител обычно накапливается к концу 2-й недели болезни. В последующем у больных титр антител нарастает в 4 — 8 раз и более, в то время как у переболевших, как правило, остаётся неизменным. В низких титрах реакция может быть положительной у привитых и больных бруцеллёзом.

  • Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА): Ставят с эритроцитарным туляремийным диагностикумом, который добавляют по 1 капле к разведениям сыворотки больного от 1:20 до 1:320 и более в объёме 0,5 мл. Диагностическим титром считается разведение 1:100 при условии его нарастания в процессе болезни. РПГА становится положительной на 2-й неделе болезни.

  • Реакция иммунофлюоресценции (РИФ): Высокоспецифичный и чувствительный метод, используют непрямой вариант. В качестве диагностикума берут взвесь вакцинного штамма в концентрации 500 млн/мл. Сыворотку разводят от 1:5 до 1:640. Диагностическим титром считают разведение 1:40 и выше, которое даёт яркое свечение поверхности бактериальных клеток. Кроме больных, положительная РИФ также регистрируется у переболевших и привитых.

Бактериологический метод и биопроба

Бактериологический метод в диагностике туляремии человека редко даёт положительные результаты. Культуру, как правило, выделяют после накопления её на восприимчивых животных. Однако даже в этом случае, несмотря на высокую чувствительность животных к туляремийному микробу, положительный результат наблюдается редко.

  • Биопроба: Используют белых мышей и морских свинок. Мышам материал вводят подкожно, морским свинкам — внутрибрюшинно. Животные погибают на 3 — 6-е сутки, иногда позднее.
  • Выделение культуры: Культуру выделяют на свернутой желточной или желточно-агаровой среде.
  • Идентификация: При идентификации опираются на морфологию и окраску возбудителя, отсутствие роста культуры на мясо-пептонном агаре (МПА), агглютинацию гомологичной сывороткой, патогенность для белых мышей и морских свинок.

Современный контекст

Современная диагностика туляремии активно дополняется молекулярно-генетическими методами, такими как полимеразная цепная реакция (ПЦР), которая позволяет быстро и специфично выявить ДНК возбудителя в клиническом материале даже на ранних стадиях болезни, до появления антител. Это особенно важно для своевременного начала лечения. Классические серологические и аллергические методы по-прежнему сохраняют своё значение для ретроспективной диагностики и эпидемиологических исследований. Вакцинопрофилактика живой туляремийной вакциной остаётся эффективным методом защиты для лиц из групп риска.